Prinsip kerja sterilizer makmal terutamanya melibatkan prinsip asas termodinamik dan mikrobiologi, dan kesan pensterilan dicapai dengan mengawal suhu dan masa. Khususnya:
Rawatan haba: Sterilizer membunuh mikroorganisma, terutamanya bakteria, virus dan ragi, dengan pemanasan. Suhu tinggi secara berkesan boleh memusnahkan struktur sel mikroorganisma, menyebabkan mereka kehilangan aktiviti biologi.
Kawalan Suhu: Sterilizer biasanya boleh mengawal suhu item yang diproses dengan tepat. Dalam pemprosesan makanan, suhu tertentu biasanya dipilih dan dikekalkan untuk masa tertentu untuk memastikan kesan pensterilan yang berkesan sambil meminimumkan kesan buruk terhadap kualiti produk.
Medium pemindahan haba: Sterilizer biasanya menggunakan stim atau air panas sebagai medium pemindahan haba, yang boleh memindahkan haba ke produk untuk mencapai suhu yang diperlukan untuk pensterilan.
Kawalan Tekanan: Sterilizer biasanya dimeteraikan untuk mengelakkan udara luaran daripada memasuki dan menjejaskan kesan pensterilan. Titik mendidih air meningkat dengan meningkatkan tekanan dalaman, dengan itu mencapai suhu pensterilan yang lebih tinggi.